VÝVOJ TERAPEUTICKÝCH POSTUPŮ – EXPERIMENTÁLNÍ LÁTKY
Nové cíle, nové technologie
Duální receptor pro endotelin-1/VEGFsp (DEspR): častý cíl na vaskulárních endoteliálních buňkách nádorů (TVEC), nádorových buňkách (TC) a nádorových kmenových buňkách (CSC) glioblastomu a karcinomu pankreatu
Victoria L.M. Herrera, Glaiza L.A. Tan, Ann Marie Moran, Kristine A. Pasion, Julius L Decano, Nelson Ruiz-Opazo
Boston University School of Medicine, Boston, MA
Východiska: Vzhledem k nízkým četnostem přežití jsou zapotřebí nové terapie pro glioblastom (GBM) a adenokarcinom pankreatu (pancreatic adenocarcinoma, PCa). V rámci řešení tohoto úkolu jsme testovali hypotézu, že inhibice DEspR, častého cíle na vaskulárních endoteliálních buňkách nádorů (tumor vascular endothelial cell, TVEC), nádorových buňkách (tumor cell, TC) a nádorových kmenových buňkách (cancer stem cell, CSC), může ovlivnit větší počet klíčových kroků při vzniku metastáz: angiogenezi, invazivnost a rezistenci vůči „anoikis“.
Metody: Byly provedeny různé analýzy: společné imunobarvení nádorové tkáně a linií nádorových buněk z PCa a GBM pomocí monoklonálních protilátek (mAb) proti CD133 a DEspR; inhibice angiogeneze a invazivnosti TC pomocí mAb proti DEspR in vitro; izolace, funkční validace a imunobarvení DEspR CSC buněčných linií z PCa (Panc1) a GBM (U87); inhibice DEspR při tvorbě nádorových sfér (tumorsphere) CSC odvozených z Panc1 a nádorového růstu xenoštěpů U87 obohacených CSC u „nude“ myší; analýza fosfoproteomu signální dráhy DEspR.
Výsledky: U PCa a GBM jsme na rozdíl od odpovídajících normálních tkání nalezli DEspR+ TVEC, TC a CD133+ putativní CSC. Exprese DEspR na TC a TVEC byla potvrzena v buněčných liniích PCa (Panc1) a GBM (U87), resp. v HUVEC s probíhající angiogenezí. Dávkově závislá inhibice pomocí mAb proti DEspR snížila angiogenezi v HUVEC a invazivnost Panc1 oproti izotypovým kontrolám. Byla zjištěna exprese DEspR+ ve funkčně validovaných Panc1 a U87 CSC s vyjádřenou tvorbou nádorových sfér, zvýšená tumorigenicita v xenoštěpových modelech u „nude“ myší a spontánní obnovení z xenoštěpových nádorů. Inhibice DEspR snížila tvorbu nádorových sfér a zvýšila počty mrtvých buněk, což svědčí pro sníženou rezistenci CSC z U87 i Panc1 vůči „anoikis“. Analýza fosfoproteomu zjistila transdukci DEspR signálu cestou fosfoproteinů, které se podílejí na komunikaci mezi TVEC a TC, angiogenezi a rezistenci vůči „anoikis“. Inhibice DEspR snížila nádorový růst v podkožních xenoštěpových nádorech obohacených CSC z Panc1 a U87 v modelech u „nude“ myší.
Závěry: Výsledky dokazují, že DEspR je častým cílem na TVEC, TC a CSC v PCa a GBM, jehož inhibice představuje potenciální léčebnou strategii pro simultánní inhibici většího počtu promaligních kroků: angiogeneze, invazivnost a rezistence vůči „anoikis“.
Journal of Clinical Oncology
Zdroj: Journal of Clinical Oncology